1. 引物：逆转录引物主要有3种，包括 oligo（dt）、random primers和基因特异性引物（gsp）。其中oligo（dt)具有12-20个t碱基，并且与真核生物mrna的3’poly a尾配对，可合成全长的cdna，但仅扩增有polya尾的mrna ，对模板质量要求高，较适合克隆实验。而random primers具有6-9个碱基，可随机识别模板并结合，适合复杂结构和微量模板，但特异性低，小片段多，适合后续qpcr实验。基因特异性引物可以识别特定模板序列，具有特异性强，灵敏度高的特点，但需合成特定的序列。所以根据不同实验需求可进行相应引物的选择。
2. 逆转录酶：一种是来自纯化的禽成髓细胞瘤病毒（amv），由两条肽链组成，具有聚合酶活性和很强的rnaseh活性，它最适温度是42℃，最适ph8.3，在高反应温度时可消除 mrna的二级结构对逆转录的阻碍，然而高水平的rnaseh的活性既抑制cdna产生也限制其长度。另一种来源于鼠白血病病毒（m-mlv），是单肽链的，有rna聚合酶活性和相对较弱的 rnaseh活性，最适温度37℃，最适ph7.6，较弱的rnaseh活性对获得2-3kb的mrna的全长cdna有很大好处。
3.rna模板：通常利用紫外分光光度计检测纯度，要求a260/280=1.9~2.1,a260/230=2.0~2.2。利用琼脂糖凝胶电泳检测rna的完整度，完整的总rna在进行琼脂糖凝胶电泳时会产生清晰的28s和18s rrna条带（真核样品），28s rrna条带的强度应当大致为18s rrna条带的两倍，并且无gdna和蛋白残留。
